液液分配色谱仪是运用混合物各组分在固定相和活动相中分配系数的不同进行别离的。一、固定相:固定相由载体和固定液组成。1、载体:载体只起负载固定液的效果。(1)要求:慵懒,无吸附才能,纯洁,颗粒均匀。(2)种类:1)硅胶:重现性差。2)硅藻土:水溶性羟基聚丙烯酸树脂运用最多。3)纤维素:纸色谱。2、固定液:理论上液液分配色谱可供挑选的固定液种类许多,但许多固定液能被溶剂溶解,只要不被活动相溶解或溶解度很小的固定液才有实用价值,因而只要少量固定液能用于液液分配色谱,如强极性的β,β′-氧二丙睛、中等极性的聚乙二醇(PEG)、非极性的十八烷(ODS)和非极性的角鲨烷等。二、活动相:要求活动相对固定液的溶解度尽可能小,因而活动相和固定液的性质往往处于两个极点。三、固定液和活动相的挑选:1、正相分配色谱:固定液的极性大于活动相的极性。(1)固定液:水、缓冲溶液、稀硫酸、甲醇和丙二醇等。(2)活动相:石油醚等。(3)洗脱次序:极性大的组分保存效果强,极水溶性羟基聚丙烯酸树脂性小的组分保存效果弱。2、反相分配色谱:固定液的极性小于活动相的极性。(1)固定液:硅油和液体白腊等极性较小的有机溶剂。(2)活动相:水、各种水溶液(酸、碱、盐及缓冲液)、与水混合的有机溶剂。(3)洗脱次序:极性小的组分保存效果强,极性大的组分保存效果弱。四、运用:因为固定水溶性羟基聚丙烯酸树脂液易丢失,重复性差,已被化学键合相色谱替代。但正相分配色谱在薄层色谱中还广泛运用。
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